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苏木精—伊红染色

苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

 

易于被碱性或酸性染料着色的性质分别被称为嗜碱性和嗜酸性,而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性。细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。伊红是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明对比。

流程

1.将脱蜡至水的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟。

2.酸水及氨水中分色,各数秒钟。

3.流水冲洗1 h后入蒸馏水片刻。

4.70%和90%酒精中脱水各10 min。

5.酒精伊红染色液染色2-3 min。

6.染色后的切片经纯酒精脱水,再经二甲苯使切片透明。

7.将已透明的切片滴上加拿大树胶,盖上盖玻片封固。

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